Использование ивабрадина в качестве маркёрного субстрата системы биотрансформации CYP3A

Введение

Фенотипитирование системы биотрансформации СYP3A, включающей основные изоферменты СYP3A4 и CYP3A5, является перспективным инструментом для  оптимизации дозирования лекарственных препаратов, являющихся субстратами этих  ферментов, а также прогнозирования риска межлекарственных взаимодействий.  Вместе с тем, ни один из существующих маркёрных субстраты CYP3A для изучения  активности этих изоферментов не может быть назван универсальным. В связи с этим  поиск новых маркёрных субстратов не утрачивает своей актуальности. 

Цель

Изучение возможности использования отношения кумулятивной почечной экскреции N-десметиливабрадина и ивабрадина у добровольцев в качестве фенотипической метрики для мониторинга активности этой системы биотрансформации на фоне приёма индукторов и ингибиторов. 

Материалы и методы

Ключевой этап работы состоял в проведении открытого перекрёстного  фармакокинетического исследования, в которое было включено 12 добровольцев,  соответствующих критериям включения и подписавших информированное согласие.  Включённые в исследование участники совершили 4 плановых визита (рисунок, в  начале которого каждый участник исследования перорально однократно принимал  натощак 10 мг ивабрадина, который запивался 250 мл воды (1, 3 и 4 визиты) или 250  мл грейпфрутового сока (визит 2). 

На протяжении 12-ти часов после однократного приёма ивабрадина, что соответствует периоду полувыведения препарата, у добровольцев собиралась моча с целью оценки  кумулятивной почечной̆ экскреции ивабрадина и его метаболита. В течение 3-х дней до  второго визита добровольцы пили 100 % восстановленный грейпфрутовый сок в  количестве 1 л/сутки. Временной промежуток между вторым и третьим визитами  («отмывочный период») составлял 7 дней, что было необходимо для восстановления  активности CYP3A4 после прекращения приёма грейпфрутового сока. В период между  третьим и четвёртым визитами участникам второго этапа исследования в качестве  индуктора изофермента CYP3A был назначен препарат растительного происхождения,  обладающий антидепрессивным и психостимулирующим действием – зверобоя  продырявленного травы экстракт сухой (капсулы, 425 мг) по 1 капсуле 2 раза в сутки  на протяжении 14 дней. Метаболическое отношение в моче, собранной за 12 ч после  однократного приёма ивабрадина, рассчитывалось по отношению кумулятивной  экскреции N-десметиливабрадина к ивабрадину, равной произведению концентрации  аналита на объём мочи. Количественное определение содержания ивабрадина и его N- десметилированного метаболита в плазме крови и моче производилось валидированным биоаналитическим методом с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуоресцентной детекции. 

Результаты

При изучении кумулятивной почечной экскреции (CE) данных веществ, оцениваемой по их абсолютному количеству в моче, собранной за 12 часов после однократного приёма  10 мг ивабрадина, было установлено, что экскреция неизменённого препарата с мочой  спустя 3 дня приёма сока грейпфрута увеличилась на 56,8 % по сравнению с исходной,  N-десметиливабрадина – на 17,3 %, что соответствовало достоверному  снижению MR на 42,1 % в моче и указывало на ингибирование изофермента CYP3A4. 
Полученные в ходе второго этапа исследования результаты выявили снижение  кумулятивной почечной экскреции неизменённого препарата на 12,3 % и повышение  выведения с мочой N-деметилированного метаболита в среднем на 33,1 % спустя 14  дней приёма добровольцами экстракта Hypericum perforatum в дозе 850 мг/сутки. При  этом метаболическое отношение, рассчитанное и по плазме, и по моче добровольцев, достоверно увеличилось по сравнению с исходом, что отражает  индукцию фермента. 

Заключение

Ивабрадин может быть использован как безопасный субстрат-маркёр для неинвазивной  оценки активности системы биотрансформации CYP3A. Метаболическое  отношение N-десметиливабрадин/ивабрадин в моче является объективным  показателем, позволяющим оценивать изменения активности CYP3A на фоне приёма  индукторов, либо ингибиторов данной изоформы.

Литература

1. Кукес В.Г., Сычёв Д.А., Раменская Г.В. и др. Оценка активности изофермента цитохрома Р450 3А4 (CYP3A4) как реальная возможность персонализации фармакотерапии // Врач, 2008, 3: 13–18.
2. Paine M.F., Criss A.B., Watkins P.B. Two major grapefruit juice components differ in time to onset of intestinal CYP3A4 inhibition // J Pharmacol Exp Ther, 2005, 312 (3): 1151.
3. Wang, Z., Gorski, J.C., Hamman, M.A., Huang, S.M. et al. The effects of St John’s wort (Hypericum perforatum) on human cytochrome P450 activity // Clin. Pharmacol. Ther, 2001, 170: 317–326.