Влияние афобазола на активность ABCB1-белка у пациентов с низкой тревожностью

Введение

ABCB1-белок (гликопротеин-Р) – АТФ-зависимый транспортёр, играющий важную роль в фармакокинетике лекарственных веществ, являющихся его субстратами (фексофенадин, дигоксин, дабигатрана этексилат и др.). Функциональная активность АВСВ1-белка может изменяться под влиянием различных факторов и веществ. Индукция АВСВ1-белка может привести к снижению эффективности терапии его субстратами, а ингибирование – к их относительной передозировке [1].

Афобазол (фабомотизол дигидрохлорид) – оригинальный отечественный анксиолитик с нейропротекторной активностью [2]. Безрецептурный отпуск из аптек и широкий спектр показаний повышает вероятность его комбинирования с другими лекарственными средствами и возможного возникновения межлекарственных взаимодействий.

Цель

Изучить влияние афобазола на активность АВСВ1-белка у пациентов с низкой тревожностью. 

Материалы и методы

В одноцентровое, простое слепое, плацебоконтролируемое, рандомизированное, перекрестное, двухэтапное сравнительное исследование влияния афобазола на активность АВСВ1-белка было включено 15 добровольцев обоего пола (22±2,24 года). Активность белка-транспортёра определяли по фармакокинетике его маркерного субстрата – фексофенадина [3]. Исследование осуществлялось на клинической базе ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России и было одобрено ЛЭК.

Критерии включения: подписанное информированное согласие добровольцев, возраст 18–45 лет, индекс массы тела от 18,5 до 30,0 кг/м , генотип СТ по полиморфному маркеру С3435Т гена MDR1, кодирующего АВСВ1-белок, способность выполнять требования протокола исследования, низкая тревожность по шкале Спилбергера–Ханина, поллиноз в анамнезе. Критерии невключения: гиперчувствительность к препаратам, заболевания сердечно-сосудистой, бронхолёгочной, нейроэндокринной, иммунной систем, желудочно-кишечного тракта, печени, почек, крови, острые инфекционные заболевания, приём любых лекарственных препаратов и веществ, влияющих на активность АВСВ1-белка, гемодинамику и функцию пищеварительной системы, наличие на скрининге отклонений от норм показателей инструментальных и лабораторных методов исследования, потеря более 450 мл крови менее чем за 2 мес. до исследования, генотипы СС и ТТ по полиморфному маркеру С3435Т гена MDR1.

Исследование состояло из периода скрининга (до 21 дня) и двух периодов госпитализации с “отмывочным” периодом не менее 5 дней. Добровольцы были рандомизированы на две группы: первая получала афобазол в дозе 10 мг три раза в день в течение 14 дней, вторая – плацебо по аналогичной схеме. После 14 дней лечения афобазолом или плацебо добровольцы госпитализировались и получали утром однократно натощак фексофенадин (Аллегра, Sanofi) per os в дозе 360 мг вместе с афобазолом/плацебо. Затем следовал отмывочный период и выполнялся перекрест исследования – в группах менялась последовательность приёма препаратов. Через 14 дней, следовала вторая госпитализация и приём фексофенадина.

На этапе скрининга у добровольцев выполнялось генотипирование по полиморфному маркеру гена MDR1, кодирующего АВСВ1-белок, на базе ЦНИЛа РязГМУ методом полимеразной цепной реакции c электрофоретической детекцией результата “SNP-ЭКСПРЕСС” (НПФ “Литех”, Россия) после выделения ДНК из лейкоцитов венозной крови.

Для оценки фармакокинетики фексофенадина (маркерного субстрата АВСВ1-белка) у каждого добровольца забирали кровь в объёме 4 мл в предварительно маркированные гепаринизированные пробирки. Образцы крови отбирали через 0,25; 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 10 и 24 ч после приёма препарата. После взятия крови пробирки центрифугировали, плазму замораживали и хранили при –30 ∞С до анализа. Концентрацию фексофенадина в плазме крови определяли методом ВЭЖХ с помощью хроматографической системы Stayer (Аквилон, Россия) с УФ-спектрофотометрическим детектором [3]. Модельнонезависимым методом рассчитывали следующие фармакокинетические параметры фексофенадина: Cmax – максимальная концентрация (нг/мл); Tmax – время достижения максимальной концентрации (ч); AUC0-t – площадь под фармакокинетической кривой концентрация–время от нуля до времени последнего забора крови (нг*ч/мл); Kel – константа элиминации; отношение Cmax / AUC0-t (1/ч) – коэффициент абсорбции.

Результаты обрабатывали с помощью программ StatSoft Statistica 7.0 (США) и Microsoft Excel. Статистическую значимость различий в значениях Tmax оценивали с помощью критерия Вилкоксона. Остальные параметры логарифмировали и подвергали дисперсионному анализу (ANOVA). Учитывали влияние последовательности приёма афобазола или плацебо, периода исследования, различий между испытуемыми и различий между фармакокинетическими параметрами фексофенадина на фоне применения афобазола и плацебо. Рассчитывали 90 % доверительный интервал (ДИ) отношения средних геометрических фармакокинетических параметров фексофенадина на фоне афобазола к его параметрам после приёма плацебо.

Результаты

На этапе скрининга были обследованы 62 человека (27 мужчин и 35 женщин), из которых были отобраны 15 человек (7 мужчин и 8 женщин). 12 человек завершили исследование в соответствии с протоколом и были включены в дальнейший анализ (по 6 человек в каждой группе).

Единственным фактором, который влиял на вариабельность Сmax, Cmax/AUC0-t и Kel были испытуемые (р < 0,05). Остальные факторы (приём афобазола или плацебо, период, последовательность) статистически значимого влияния не оказали (p > 0,05).

AUC0-t фексофенадина после приёма афобазола увеличивалась по сравнению с показателями у добровольцев при приёме плацебо в 1,33 раза (90 % ДИ 1,13–1,55, p = 0,008). Вклад факторов – период и последовательность приёма для AUC0-t являлся статистически незначимым (p > 0,05).

Полученные изменения фармакокинетики фексофенадина свидетельствуют о повышении его содержания в организме добровольцев после введения афобазола, и, соответственно, о снижении активности АВСВ1-белка.

Заключение

Афобазол ингибирует активность АВСВ1-белка у пациентов с низкой тревожностью.

Литература

1. Якушева Е.Н., Черных И.В., Щулькин А.В., Попова Н.М. Гликопротеин-Р: структура, физиологическая роль и молекулярные механизмы модуляции функциональной активности // Успехи физиологических наук. – 2014. – Т. 45. – № 4. – С. 89–98. [YAkusheva EN, CHernyh IV, SHCHul’kin AV, Popova NM. Glikoprotein-R: struktura, fiziologicheskaya rol’ i molekulyarnye mekhanizmy modulyacii funkcional’noĭ aktivnosti. Uspekhi fiziologicheskih nauk. 2014;45(4):89–98. (In Russ).]
2. Середенин С.Б., Воронин М.В. Фармакология нового анксиолитика афобазола // Экспериментальная и клиническая фармакология. – 2009. – Т. 72. – № 1. – С. 3–11. [Seredenin SB, Voronin V. Farmakologiya novogo anksiolitika afobazola. Eksperimental’naya i klinicheskaya farmakologiya. 2009;72(1):3–11. (In Russ).]
3. Якушева Е.Н., Черных И.В., Щулькин А.В., Гацанога М.В. Разработка ВЭЖХ-методики количественного анализа фексофенадина в плазме крови // Фармакокинетика и фармакодинамика. – 2017. – № 2. – С. 35–38. [Yakusheva EN, Chernykh IV, Shulkin AV, Gatsanoga MV. Design of HPLC methods of fexofenadine quantitative analysis in blood plasma. Farmakokinetika i farmakodinamika. 2017;2:35–38. (In Russ).]