Роль носительства однонуклеотидных вариантов генов CYP2D6 и ABCB1 в эффективности терапии препаратами вальпроевой кислоты у пациентов с эпилепсией

Введение 

Среди факторов, отвечающих за фармакокинетику противоэпилептических препаратов, можно выделить комплекс ферментов цитохрома Р450, ферменты семейства уридин-5-дифосфат глюкуронилтрансферазы и гликопротеин Р (продукт гена ABCB1) – транспортный белок, препятствующий всасыванию лекарственных средств (ЛС) в кишечнике, проникновению их через гистогематические барьеры, а также способствующий выведению ЛС в желчь и мочу. Ключевыми цитохромами, участвующими в биотрансформации вальпроевой кислоты (ВК) до конечных метаболитов 4-ene-VPA, 4-OH-VPA и 5-OH-VPA, являются CYP2C9, CYP2А6 и, в меньшей степени, CYP2B6 [1]. Вместе с тем, формирование метаболитов на уровне других цитохромов (в том числе, CYP2D6) показано у 1–8 % пациентов с генотипом CYP2C9*1 [2]. Изменение активности гликопротеина Р, экспрессирующегося в ЦНС эндотелиальными клетками, астроцитами и нейронами, может влиять на внутримозговую концентрацию препаратов, а также способствовать развитию фармакорезистентности. При этом роль гликопротеина P в фармакокинетике ВК остаётся предметом дискуссии [3].

Цель 

Выявление роли носительства клинически значимых полиморфных аллельных вариантов генов CYP2D6 и ABCB1 в кумуляции ВК и эффективности противоэпилептической терапии у пациентов с эпилепсией из различных регионов России.

Материалы и методы

Обследовано 94 взрослых пациента с эпилепсией обоего пола из гг. Москвы (29/94), Самары (36/94) и Красноярска (29/94). Выделение ДНК из лейкоцитарной взвеси производили сорбционным методом с помощью набора «ДНК-Сорб-B» (103-20, «АмплиПрайм»). Носительство однонуклеотидных вариантов (ОНВ) генов CYP2D6 (*3, *4, *10) и ABCB1 (rs1045642, rs1128503, rs2032582 – аллель T ассоциирован со снижением экспрессии гена) определяли с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием технологии TaqMan («Applied Biosystems», США). Терапевтический лекарственный мониторинг проводили через 12 ч (ТЛМ1) и через 2 ч после приёма ВК (ТЛМ2). Эффективность терапии оценивали по виду и кратности эпилептических приступов на фоне лечения. Для статистической обработки использовали онлайн-калькулятор «Ген Эксперт» http://gen-exp.ru.

Результаты

Показаны статистически значимые межрегиональные отличия в частоте носительства рисковых полиморфных вариантов CYP2D6: промежуточные метаболизаторы с генотипом *1/*10 преобладали среди жителей Самары, компаунд-гетерозиготы *4/*10 – среди красноярцев (p < 0,001). В то же время, во всех группах пациентов был выявлен только мажорный аллель А CYP2D6*3, ассоциированный с нормальной активностью фермента. По данным ТЛМ1, у компаунд-гетерозигот отмечались более высокие концентрации ВК (p = 0,02) по сравнению с носителями генотипов *1/*1 и *1/*10 (пациенты с генотипом *1/*4 и гомозиготы по рисковым вариантам в исследуемых выборках отсутствовали), при этом ассоциации генотипа CYP2D6 с эффективностью терапии выявлено не было (p = 0,053). Значимых межрегиональных различий в частоте носительства аллелей и генотипов ОНВ rs1045642, rs1128503 и rs2032582 гена ABCB1 не наблюдалось (p > 0,05). Носительство аллеля Т исследуемых ОНВ как в гетеро-, так и в гомозиготном состоянии, не оказывало значимого влияния на пиковую и остаточную концентрацию ВК по данным ТЛМ2 и ТЛМ1 (p > 0,05), а также не коррелировало с эффективностью терапии.

Заключение

Компаунд-гетерозиготное носительство полиморфных вариантов CYP2D6*4 (вариант акцепторного сплайс-сайта) и *10 (миссенс-мутация P34S) способствует кумуляции ВК у пациентов с эпилепсией. Изменение экспрессии гликопротеина P не оказывает влияния на уровень ВК в плазме крови и эффективность проводимой терапии.

Литература

1. Ghodke-Puranik Y, Thorn CF, Lamba JK, et al. Valproic acid pathway: pharmacokinetics and pharmacodynamics. Pharmacogenet Genomics.2013;23(4):236–241.

2. Пилюгина М.С. Пути метаболизма препаратов вальпроевой кислоты и карбамазепина // Вестник КБ №51. – 2010. – Т. 3. – № 10. – С. 52-55. [Pilugina MS. Metabolic pathways of valproic acid and carbamazepine. Vestnik KB №51. 2010;3(10):52–55. (In Russ).]
3. Baltes S, Fedrowitz M, Tortós CL, et al. Valproic acid is not a substrate for P-glycoprotein or multidrug resistance proteins 1 and 2 in a number of in vitro and in vivo transport assays. J Pharmacol Exp Ther. 2007;320(1):331–343.