Связь полиморфных маркеров генов ERCC2, ERCC5 и ABCB1 с ответом на лечение при онкологических заболеваниях на фоне беременности

Введение

Тактика лечения у беременных с онкологическими заболеваниями остаётся крайне актуальным вопросом современной медицины. При настойчивом желании женщины сохранить беременность, матери может быть предложена химиотерапия (ХТ) до родоразрешения. В зависимости от вида рака применяются различные схемы лечения, однако большая часть из них содержит в своём составе соединения платины и другие повреждающие ДНК препараты, такие как алкилирующие соединения и антрациклины [1].

С фармакогенетикой лекарственных веществ, применяющихся в лечении онкологических заболеваний тесно связан ряд генов, включающих в себя гены транспортных белков, отвечающие за перенос препаратов через плазматическую мембрану клетки. Для гена ABCB1, ранее известного как ген множественной лекарственной устойчивости 1 (MDR1), установлено большое число полиморфных вариантов, из которых наиболее функционально значимыми являются rs2032582 и rs1045642, которые сопровождаются изменением аминокислотного состава белка PgP.

Ответ на ХТ может быть обусловлен активностью систем репарации ДНК, в частности, системы эксцизионной репарации оснований (BER) или нуклеотидов (NER). Интегральным белком BER, координирующим сборку всего белкового комплекса репарации, является XRCC1, который кодируется геном XRCC1 [2]. Система репарации NER и изменения в ней, в частности, однонуклеотидные полиморфизмы, также играют важную роль в ответе на цитотоксическую терапию [3]. Ключевыми генами системы NER являются гены ERCC2 и ERCC5. Lys751Gln — один из основных полиморфизмов гена ERCC2 (rs13181), который приводит к изменению аминокислоты Lys (лизина) на Gln (глутамин) в С-концевой части белка и его функционирования, тем самым влияя на эффективность репарации ДНК. Продукт гена ERCC5 обладает эндонуклеазной активностью и участвует во внесении 3’-разреза в область повреждения при репарации путём NER [4]. Одним из наиболее изученных полиморфных маркеров гена ERCC5 является rs17655, который приводит к аминокислотной замене аспарагиновой кислоты (Asp) на гистидин (His) в С-концевой части белка. Это вызывает изменения функции белка и его взаимодействия с комплексом белков NER, влияя тем самым на активность репарации ДНК [5].

В связи с минимальным объёмом научной информации по данному вопросу работа по индивидуализации лечения пациенток с онкологическими заболеваниями на фоне беременности является крайне актуальной. В работе были изучены полиморфные маркеры генов как наименее подверженные метаболическим изменениям в ходе беременности.

Цель

Изучение связи полиморфных маркеров генов репарации ДНК ERCC2 (rs13181), ERCC5 (rs17655), транспортного белка ABCB1 (rs1045642, rs2032582) с клиническим ответом и степенью патоморфологической регрессии (ПР) опухоли у беременных женщин с онкологическими заболеваниями после ХТ препаратами платины.

Материалы и методы

В ходе исследования были изучены образцы крови 36 беременных пациенток с медианой возраста 35 лет (19–42) с онкологическими заболеваниями, проходивших лечение в НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова. Среди диагнозов преобладал рак шейки матки (34 %), рак молочной железы (28 %) и опухоли кишечника (19 %), другие виды рака составляли 19 %. Все пациенты получали ХТ с использованием препаратов платины и/или другие повреждающие ДНК препараты, такие как алкилирующие соединения и антрациклины. Образцы крови отбирались до проведения ХТ, после чего из них была выделена ДНК с использованием набора реагентов «QIAamp DNA Mini Kit» (Qiagen, Германия). Полиморфные маркеры генов были исследованы методом ПЦР в реальном времени с флуоресцентными аллель-специфичными зондами на приборе «CFX96 Touch Real-Time System» (Bio-Rad, США). Результаты определения статуса маркеров сопоставляли с клиническим ответом, степенью ПР опухоли с использованием метода логистической регрессии.

Результаты

Выявлена связь полиморфного маркера rs2032582 гена ABCB1 с клиническим ответом опухоли. Прослеживается связь с лучшим ответом на лечение при отсутствии минорного аллеля А как в случае достижения полного клинического ответа (р = 0,027), так и для достижения полного ответа и ответа 3 степени (р = 0,039). При этом среди пациентов с наличием аллеля А выявлено значительно большее количество ответов 1–2 степени (83 %) по сравнению с больными, у которых этот аллель отсутствовал (17 %).

Для маркера rs1045642 гена ABCB1 выявлена сходная зависимость — при носительстве минорного аллеля А наблюдается значительно меньший процент достижения полного ответа и ответа 3 степени (р = 0,039), это также прослеживается для генотипа А/А (р = 0,026).

Данные о степени ПР были доступны для 17 больных. Была выявлена связь маркера rs1045642 гена ABCB1 с достижением полной ПР и ПР 3 степени при носительстве аллеля G (р = 0,01). При этом в случае отсутствия аллеля G (генотип А/А) степень ПР у всех таких больных была 1 или 2, то есть наблюдался худший ответ опухоли на лечение. Достижение полной ПР было связано с носительством аллеля G на уровне тенденции (р = 0,06).

Заключение

В работе выявлена связь полиморфного маркера rs2032582 гена ABCB1 с наличием полного клинического ответа опухоли (р = 0,027), полиморфного маркера rs1045642 гена ABCB1 со степенью патоморфоза опухоли (р = 0,01) у беременных пациенток с онкологическими заболеваниями.