Полиморфные варианты гена MDR1 и генов цитохоромов Р450 с лекарственно-индуцированной гиперпролактинемией у больных шизофренией

Введение

На сегодняшний день нейролептическая терапия является наиболее эффективным средством в борьбе с шизофренией. Лечение больных шизофренией проводится в  основном нейролептиками, которые нацелено, действуют на шизофренические  расстройства и обладают широким спектром действия. Помимо этого, также существует  и ряд побочных эффектов, значительно снижающих эффективность  терапии и качество жизни пациентов. Одним из побочных эффектов  антипсихотической терапии является лекарственно-индуцированная гиперпролактинемия. Атипичные антипсихотики в меньшей степени  становятся причиной возникновения гиперпролактинемии, чем галоперидол, за  исключением рисперидона и амисульприда [1]. 
В исследовании для нас представляют интерес как цитохромы, так и ген белка  множественной лекарственной устойчивости. Pgp – белок переносчик с высокой  специфичностью. Исследования in vitro показали, что спектр субстратов Рgp включает  не только противоопухолевые препараты, но и препараты, используемые для реверсии  множественной лекарственной устойчивости, флуоресцентные красители, стероидные  гормоны [2]. Субстратами Pgp являются многие широко применяемые лекарственные  средства: сердечные гликозиды, блокаторы Н1 гистаминовых рецепторов, некоторые  цитостатики, антиретровирусные препараты, антипсихотки и другие. Следует отметить,  что многие лекарственные средства являются субстратами не только Pgp, но  и изофермента цитохрома Р 450 (CYP3A4) [3]. Цитохром Р 450 имеет  множество изоформ – изоферментов. 
В настоящее время выделено более 1 000 изоферментов цитохрома Р 450.  Изоферменты цитохрома Р 450, по классификации Nebert D.W., принято разделять по  гомологии нуклеотид/аминокислотной последовательности на семейства [4]. 

Цель

Целью работы является изучение роли полиморфных вариантов генов системы  цитохромов и гена белка множественной лекарственной устойчивости в патогенезе  развития гиперпролактинемии у больных шизофренией. 

Материалы и методы

Проводили исследование после получения информированного согласия: в  исследование включили 446 пациентов, этнически русских, из них 225 женщин и 221  мужчина, средний возраст 42,1 ± 1,4 (от 18 до 77 лет включительно) с диагнозом  параноидной шизофрении в соответствии с диагностическими критериями МКБ 10. 
В качестве материала для исследования была использована венозная кровь. Венозную  кровь брали из локтевой вены в период с 8.00 до 9.00 натощак в пробирки фирмы BD  Vacutainer с антикоагулянтом ЭДТА. 
Полученную кровь использовали для выделения ДНК. 
Определение содержания гормона пролактина в сыворотке крови проводилось  иммуноферментным методом с использованием набора реагентов PRL Test System.  Границы нормальных значений содержания гормона пролактина в крови: для мужчин – до 20 нг/мл, для женщин – до 25 нг/мл. Для получения ДНК использовался  стандартный фенол хлороформный метод. Генотипирование по выбранным генам  проводилось c использованием генетического анализатора The MassARRAY® System by  Agena Bioscience, а также ПЦР в реальном времени на QuantStudio 3 (Applied Biosystems) и Biorad CFX-96. 

Результаты

Анализ полиморфизмов генов системы цитохромов Р 450 (CYP1A2*1F, CYP2D6*3,  CYP2D6*4, CYP2C19*2, CYP2C19*3, CYP2C19*17) и белка множественной устойчивости  (MDR1) показал, что наблюдаемое распределение генотипов для всех изучаемых генов  соответствует ожидаемому при равновесии Харди–Вайнберга. 
Генотипирование по гену CYP1A2*1F между группами пациентов с  гиперпролактинемией и без гиперпролактинемии не выявило статистически значимых  ассоциаций по исследуемым полиморфным варианта (rs206952: χχ2 = 1,326, p = 0,249;  rs762551: χχ2 = 3,012, p = 0,222). 
Последующий анализ частот генотипов пациентов с гиперпролактинемией и без неё по  цитохромам CYP2D6*3 (rs35742686, χχ2 = 0,263, p = 0,608), CYP2D6*4 (rs3892097,  χχ2 = 2,376, p = 0,306), CYP2C19*3 (rs4986893,χ χ2 = 0,482, p = 0,487), CYP2C19*17  (rs12248560, χχ2 = 0,296, p = 0,863), CYP2C19*2 (rs4244285, χχ2 = 0,023, p = 0,988)  также не выявил никаких статистически значимых результатов в пользу гипотезы  принадлежности этих полиморфных вариантов к развитию лекарственно- индуцированной гиперпролактинемии. 
Заключительным этапом статистического анализа результатов было сравнение частот  генотипов полиморфных вариантов rs9282564 гена белка множественной  лекарственной устойчивости MDR1 (χ2 = 0,585, p = 0,747, rs2235015, χχ2 = 2,894, p =  0,235), который также не выявил значимых отличий посредством статистического  анализа. 

Заключение

Проведённое исследование показало отсутствие ассоциаций исследуемых  полиморфизмов генов системы цитохромов с развитием гиперпролактинемии в русской  популяции больных шизофрении региона Сибири. 
Несмотря на то, что пилотное исследование одного полиморфизма rs9282564 гена  белка множественной лекарственной устойчивости MDR1 не позволило получить  данных, подтверждающих участие MDR1 в патогенезе гиперпролактинемии у больных  шизофренией, необходимо продолжение дальнейшего поиска ассоциаций других  полиморфных вариантов этого потенциального гена-кандидата фармакологического  ответа. 
Исследование выполнено при финансовой поддержке РНФ 14-35-00023 «Лаборатория  фармакогенетических исследований персонализированной терапии психических и  нейродегенеративных расстройств» и РФФИ 17-29-06035 «Новые подходы к  фармакогенетике антипсихотик-индуцированной гиперпролактинемии у больных  шизофренией. 

Литература

1. Kovacs L., Kovacs G. Endocrine side effects among psychiatric patients treated with antipsychotics. Neuropsychopharmacol. Hung., 2006, vol. 8, no. 2: 61–66.
2. Bradley G., Ling V. P-glycoprotein, multidrug resistance and tumor progression. Cancer and Metast. Reviews, 1994; vol. 13: 223–233.
3. Schwab M., Eichelbaum M., Fromm M.F. Genetic polymorphisms of the human MDRI drug transporter. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol, 2003, vol. 43: 285–307.
4. Nebert D.W., Gonzalez F.J. P450 Genes: Structure, Evolution, and Regulation. Annual Review of Biochemistry, 1987, vol. 56: 945–993.