Рациональность определения носительства полиморфного маркера G735A гена DPYD у онкологических пациентов в Челябинской области. Результаты пилотного исследования

Введение

Проблема борьбы с онкологическими заболеваниями остаётся приоритетной во всём мире. Онкологические заболевания являются второй из основных причин смерти в мире; так, в 2018 г. от этого заболевания умерли 9,6 млн человек [1]. Персонализированный подход к лечению онкологических больных предполагает индивидуализированный подбор схем лекарственной терапии и дозировки препаратов, которые должны учитывать генетические особенности каждого пациента.

Фармакогенетическое тестирование, предваряющее назначение лекарственных средств, широко включено в рекомендации международных и национальных профессиональных научных организаций [2].

В схемах химиотерапии рака толстой кишки (распространённого рака желудка, рака яичников, рака лёгких и других) наиболее часто используются препараты на основе фторпиримидинов (5-фторурацил и капецитабин), а также иринотекан [3].

Частота носительства аллельного варианта G735A гена DPYD в российской популяции составляет 0,69 %, что сопоставимо с другими европейскими этническими группами.

Гомозиготное носительство полиморфного маркера G735A ассоциируется с замедлением биотрансформации 5-фторурацила и капецитабина, высокими значениями их концентрации в плазме крови и повышенным риском развития выраженных НЛР [4].

При выявлении генотипа AA по полиморфному маркеру G735A гена DPYD рекомендуется отказаться от применения 5-фторурацила и капецитабина из-за очень высокого риска развития выраженных НЛР.

При выявлении генотипа GA по полиморфному маркеру G735A гена DPYD рекомендуется начинать лечение 5-фторурацилом и капецитабином с дозы, составляющей 50 % от регламентированной в инструкции по медицинскому применению.

Цель

Оценить рациональность определения носительства мутации G735A в гене DPYD, выявленного методом ПЦР, у пациентов, которым назначен 5-фторурацил или капецитабин в Челябинской области.

Материалы и методы 

В данном пилотном исследовании рассматривается рациональность применения фармакогенетического тестирования для прогнозирования высокой токсичности (нейротоксичности, кардиотоксичности и т. д.) фторурацила и капецитабина, выбора режима дозирования данных препаратов. В данном варианте тестирования определяется полиморфный маркер G735A гена DPYD (кодирует фермент дигидропиримидиндигидрогеназу, которая осуществляет биотрансформацию 5-фторурацила и капецитабина до неактивных метаболитов).

В основе фармакогенетического тестирования (ФГТ) лежит обнаружение определённых генотипов, ассоциированных с измененным фармакологическим ответом. Для определения данных генотипов используется метод ПЦР. В исследовании в качестве генетического материала использовалась кровь. Сбор крови не требовал особой подготовки больного и осуществлялся при помощи системы «Vacuette» в пробирки с этилендиаминтетрауксусной кислотой в качестве консерванта. Расшифровка необходимых генотипов осуществлялась врачом лабораторной диагностики при помощи детектирующего амплификатора DT-96 («НПО ДНК-Технология», Россия) и наборов реагентов для выявления мутации G735A в гене DPYD с использованием ПЦР в режиме реального времени (производитель ООО «БиоЛинк», Россия).

Расшифровка результатов фармакогенетического тестирования для оценки токсичности проводилась    с учётом практических рекомендаций и информации в базе данных The Pharmacogenomics Knowledgebase (www.pharmgkb.org). После интерпретации результата проводилась необходимая персонализированная коррекция терапии для конкретного пациента, включающая определение подходящего лекарственного препарата и режим дозирования.

Оценка гематотоксичности проводилась по данным общего анализа крови до начала терапии и после завершения курса терапии, оценка гепатотоксичности проводилась по данным общего биохимического анализа крови (общий билирубин, АСТ, АЛТ) до начала терапии и после завершения курса терапии, оценка нефротоксичности проводилась по данным общего биохимического анализа крови (мочевина, креатинин) до начала терапии и после завершения курса терапии, оценка гастроинтестинальной токсичности проводилась по шкале токсичности (критерии NCI CTC версия 4.03, 2010 г.) до начала терапии и после окончания. Обработка данных проводилась при помощи статистических программ (MS Excel, SPSS Statistics 15.0).

Результаты

Для промежуточных метаболизаторов рекомендовало снизить дозу фторпиримидинов на 50 % от полной стандартной дозы у гетерозиготных носителей вариантов со сниженной функцией c.2846A>T (rs67376798) или c.1129–5923C>G (rs75017182). Для гомозиготных носителей аллелей со сниженной функцией рекомендовано назначение альтернативного лекарственного препарата [5].

Исследование включило результаты обследования 36 пациентов. Средний возраст пациентов, вошедших в исследование, составил 63,0±11,57 лет, 61,1 % пациентов были мужского пола. Все 100 % пациентов были отнесены к европеоидной расе, национальная принадлежность – русские.

На данном этапе исследования среди обследованных пациентов не было выявлено генов, ассоциированных с токсичностью фторурацила и капецитабина, также не было выявлено и критических проявлений токсичности от применения данных лекарственных препаратов по данным проведённых клинико-лабораторных обследований.

Заключение

Размер выборки для формирования однозначных выводов корреляции токсичности с носительством полиморфного маркера G735A гена DPYD пока недостаточен. Необходимо расширение объёма выборки. Данное исследование рассматривается как пилотное. Однако, вероятнее всего, учитывая низкую распространённость частоты встречаемости мутантных аллелей, применение данного вида тестирования в регионе будет нецелесообразным.

Литература

1. Рак. Информационный бюллетень ВОЗ [Электронный ресурс]. – 2018. – № 297. [Rak. Informacionnyj byulleten’ VOZ [Internet]. 2018;297. (In Russ).] Режим доступа: https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/cancer (дата обращения: 25.11.2019).
2. Caudle KE, Klein TE, Müller DJ, et al. Incorporation of Pharmacogenomics into Routine Clinical Practice: the Clinical Pharmacogenetics Implementation Consortium (CPIC) Guideline Development Process. Current Drug Metabolism. 2014;15(2):209–217. DOI: 10.2174/1389200215666140 130124910
3. Переводчикова Н.И., Горбунова Н.А. Руководство по химиотерапии опухолевых заболеваний. – М.: Практическая медицина: 2015. [Perevodchikova N.I., Gorbunova N.A. Rukovodstvo po himioterapii opuholevyh zabolevanij. Moscow; Prakticheskaya medicina: 2017. (In Russ).]
4. Сычев Д.А. Фармакогенетическое тестирование: клиническая интерпретация результатов. (рекомендации для практикующих врачей). – М.; 2011. [Sychev D.A. Farmakogeneticheskoe testirovanie: klinicheskaya interpretaciya rezul’tatov. (rekomendacii dlya praktikuyushchih vrachej). Moscow; 2017. (In Russ).]
5. Amstutz U, Henricks L, Offer S, et al. Clinical Pharmacogenetics Implementation Consortium (CPIC) Guideline for Dihydropyrimidine Dehydrogenase Genotype and Fluoropyrimidine Dosing: 2017 Update. Clinical Pharmacology & Therapeutics. 103(2), pp. 210–216. DOI: 10.1002/cpt.911