phgenomicsФармакогенетика и фармакогеномикаPharmacogenetics and Pharmacogenomics2588-05272686-8849LLC "Izdatelstvo OKI"10.24411/2588-0527-2019-10047phgenomics-122Research ArticleФАРМАКОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯPHARMACOGENETICS STUDYИсследование полиморфизма генов системы регуляции артериального давления, транспортера SLCO1B1 и карбоксилэстеразы 1 (CES1) у больных артериальной гипертензией, принимающих эналаприлИконниковаА. Ю.noemail@neicon.ruСеляеваЛ. С.noemail@neicon.ruНаседкинаТ. В.noemail@neicon.ruРодинаТ. А.noemail@neicon.ruМельниковЕ. С.noemail@neicon.ruДмитриевА. И.noemail@neicon.ruКазаковР. Е.noemail@neicon.ruФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта Российской академии наук (ИМБ РАН)Russian FederationФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России (ФГБУ НЦЭСМП)Russian Federation201922122019021315Copyright © Иконникова А.Ю., Селяева Л.С., Наседкина Т.В., Родина Т.А., Мельников Е.С., Дмитриев А.И., Казаков Р.Е., 20192019Иконникова А.Ю., Селяева Л.С., Наседкина Т.В., Родина Т.А., Мельников Е.С., Дмитриев А.И., Казаков Р.Е.Иконникова А.Ю., Селяева Л.С., Наседкина Т.В., Родина Т.А., Мельников Е.С., Дмитриев А.И., Казаков Р.Е.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmacogenetics-pharmacogenomics.ru/jour/article/view/122
Определение распространённости аллельных вариантов генов системы регуляции АД, а также генов, участвующих в транспорте и метаболизме эналаприла у пациентов с артериальной гипертензией, принимающих эналаприл.
Препарат из класса ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента (АПФ) эналаприл широко используется в качестве антигипертензивного средства. Эналаприл гидролизуется до активного метаболита энаприлата при участии фермента карбоксилэстеразы 1 (CES1). Было показано, что аллельные варианты гена CES1, обусловливающие низкую ферментативную активность, могут влиять на метаболизм эналаприла и других ингибиторов АПФ [1].
Мишенью препарата является ангиотензинпревращающий фермент, участвующий в многокомпонентном каскаде системы регуляции артериального давления (АД). В ряде исследований было показано влияние полиморфизма генов этой системы на эффективность применения эналаприла и вероятность развития нежелательных лекарственных реакций (НЛР) [2]. Была обнаружена ассоциация полиморфных вариантов гена SLCO1B1, кодирующего транспортёр органических анионов OATP1B1, который участвует в выводе из печени многих лекарственных средств (в том числе эналаприла), с повышенным риском развития кашля при приёме эналаприла [3].
Таким образом, известен ряд генов, полиморфные варианты которых могут выступать информативными фармакогенетическими маркерами, связанными с эффективностью и риском развития НЛР при приёме эналаприла.
Цель
Определить распространённость аллельных вариантов генов системы регуляции АД, а также генов, участвующих в транспорте и метаболизме эналаприла у пациентов с артериальной гипертензией, принимающих эналаприл.
Материалы и методы
В исследование были включены 65 пациентов с артериальной гипертензией, которые получали антигипертензивную монотерапию эналаприлом. Подбор дозы эналаприла осуществлялся на основе офисного мониторинга АД. Проводилось определение фармакокинетических показателей (рассчитывали соотношение концентраций эналаприла и эналаприлата в сыворотке крови до очередного приёма эналаприла и через 4 ч после приёма препарата при его курсовом применении) [4, 5].
Определение генетических вариантов REN (rs2368564), AGT (rs699), AGTR1 (rs5186), BKR2 (rs1799722), ADRB2 (rs1042714, rs1042713), SLCO1B1 (rs4149056) осуществлялось с помощью гидрогелевого биочипа (ИМБ РАН). Инсерционно-делеционный полиморфизм гена АСЕ (rs1799752) определяли методом ПЦР с последующим электрофорезом в агарозном геле. Для анализа гена CES1 определяли число копий гена (CES1A1), псевдогена (CES1P1) и гибрида гена и псевдогена (CES1A2) с помощью количественной ПЦР в режиме реального времени. У образцов с CES1A2 определяли наличие сильного промотора с SP(+) сайтами, который приводит к повышенной транскрипционной активности. Анализ rs71647871 осуществляли методом ПЦР в реальном времени с использованием в качестве матрицы фрагмента 12,5 т.п.о., полученного с помощью ПЦР длинных фрагментов и специфичного для области от промотора до экзона 5 CES1A1. Определение rs2244613 гена CES1 осуществляли с помощью набора «ГенТест CES1» (ООО «Номотек») с использованием геномной ДНК.
Результаты
Частоты генотипов REN (rs2368564), AGT (rs699), AGTR1 (rs5186), BKR2 (rs1799722), ADRB2 (rs1042714, rs1042713), SLCO1B1 (rs4149056), АСЕ (rs1799752) представлены в табл. 1. Распределение генотипов соответствует равновесию Харди–Вайнберга.
Генотипирование CES1 было проведено для 64 образцов. Частоты диплотипов, определённые на основе анализа числа копий гена и псевдогена, приведены в табл. 2. Сильный промотор в CES1A2 выявлен в 1 образце. Результаты генотипирования по rs2244613 и rs71647871 представлены в табл. 2.
Заключение
В ходе работы нами было проведено генотипирование выборки пациентов, получавших антигипертензивную монотерапию эналаприлом. Полиморфные варианты генов, продукты которых участвуют в транспорте и метаболизме этого препарата, а также генов системы регуляции АД, широко распространены в популяции. В продолжение работы планируется провести сопоставление генотипов с данными об эффективности и фармакокинетике эналаприла в исследуемой выборке, а также включить в анализ большее число полиморфных вариантов в гене CES1, которые могут оказывать влияние на его функциональную активность.
Таблица 1
Частоты генотипов генов системы регуляции АД и гена SLCO1B1
Таблица 2
Результаты генотипирования гена CES1
Таблица 1
Частоты генотипов генов системы регуляции АД и гена SLCO1B1
Таблица 2
Результаты генотипирования гена CES1
Литература
ReferencesTarkiainen EK, Tornio A, Holmberg MT et al. Effect of carboxylesterase 1 c.428G > A single nucleotide variation on the pharmacokinetics of quinapril and enalapril. Br J Clin Pharmacol. 2015;80(5):1131–1138. DOI: 10.1111/bcp.12667Tarkiainen EK, Tornio A, Holmberg MT et al. Effect of carboxylesterase 1 c.428G > A single nucleotide variation on the pharmacokinetics of quinapril and enalapril. Br J Clin Pharmacol. 2015;80(5):1131–1138. DOI: 10.1111/bcp.12667Mukae S, Itoh S, Aoki S, Iwata T, Nishio K, Sato R, Katagiri T. Association of polymorphisms of the renin-angiotensin system and bradykinin B2 receptor with ACE-inhibitor-related cough. J Hum Hypertens. 2002;16(12):857–863.Mukae S, Itoh S, Aoki S, Iwata T, Nishio K, Sato R, Katagiri T. Association of polymorphisms of the renin-angiotensin system and bradykinin B2 receptor with ACE-inhibitor-related cough. J Hum Hypertens. 2002;16(12):857–863.Luo JQ, He FZ, Wang ZM, et al. SLCO1B1 Variants and Angiotensin Converting Enzyme Inhibitor (Enalapril)-Induced Cough: a Pharmacogenetic Study. Sci Rep. 2015;5:17253. DOI: 10.1038/srep17253Luo JQ, He FZ, Wang ZM, et al. SLCO1B1 Variants and Angiotensin Converting Enzyme Inhibitor (Enalapril)-Induced Cough: a Pharmacogenetic Study. Sci Rep. 2015;5:17253. DOI: 10.1038/srep17253Родина Т.А., Мельников Е.С., Белков С.А., и др. Экспресс-методика определения эналаприла и его основного метаболита эналаприлата в сыворотке крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС // Разработка и регистрация лекарственных средств. –2016. – № 4. – С. 184–189. [Rodina T.A., Melnikov E.S., Belkov S.A., et al. Express method for determination of enalapril and enalaprilat in human serum by HPLC-MS/MS. Drug development & registration. 2016;(4):184–189. (In Russ).]Родина Т.А., Мельников Е.С., Белков С.А., и др. Экспресс-методика определения эналаприла и его основного метаболита эналаприлата в сыворотке крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС // Разработка и регистрация лекарственных средств. –2016. – № 4. – С. 184–189. [Rodina T.A., Melnikov E.S., Belkov S.A., et al. Express method for determination of enalapril and enalaprilat in human serum by HPLC-MS/MS. Drug development & registration. 2016;(4):184–189. (In Russ).]Журавлева М.В., Прокофьев А.Б., Дмитриев А.И., и др. Особенности фармакокинетики эналаприла у больных артериальной гипертензией в зависимости от скорости клубочковой фильтрации // CardioСоматика. 2019;10(3):37–41. [Zhuravleva MV, Prokofiev AB, Dmitriev AI, et al. Pharmacokinetics of enalapril in patients with arterial hypertension depending on the glomerular filtration rate. Cardiosomatics. 2019;10(3):37–41. (In Russ).] DOI: 10.26442/22217185.2019.3.190409Журавлева М.В., Прокофьев А.Б., Дмитриев А.И., и др. Особенности фармакокинетики эналаприла у больных артериальной гипертензией в зависимости от скорости клубочковой фильтрации // CardioСоматика. 2019;10(3):37–41. [Zhuravleva MV, Prokofiev AB, Dmitriev AI, et al. Pharmacokinetics of enalapril in patients with arterial hypertension depending on the glomerular filtration rate. Cardiosomatics. 2019;10(3):37–41. (In Russ).] DOI: 10.26442/22217185.2019.3.190409
The authors declare that there are no conflicts of interest present.